Obiettivi formativi
La partecipazione alle attività formative previste (lezioni frontali ed esercitazioni pratiche di laboratorio) consentirà agli studenti del Corso di Studi in Scienze Biologiche di acquisire le conoscenze generali e le nozioni fondamentali per la coltura di cellule animali.
L'insegnamento si propone di descrivere i principi di base delle colture cellulari e del loro utilizzo in molti campi della sperimentazione biomedica e della diagnostica.
Il corso prevede una parte teorica che illustra:
1. Vantaggi e svantaggi delle colture di cellule animali rispetto alla sperimentazione con animali
2. Ottenimento e propagazione di linee cellulari: colture cellulari primarie e stabilizzate; linee cellulari ingegnerizzate.
3. Tipi di colture cellulari: mono e co-colture bi- e tridimensionali di cellule in sospensione ed in adesione.
4. Modelli cellulari utilizzati nel campo delle tecnologie biologiche e mediche
5. Architettura di un Laboratorio di colture cellulari e norme di sicurezza:
i) Corretto utilizzo di cappe biologiche, incubatori, centrifughe, pipette e pipettatori, reagenti e materiali per le colture cellulari.
ii) La contaminazione delle colture cellulari; Il rischio biologico associato alla manipolazione di cellule umane e le fondamentali procedure biohazard da utilizzare nel laboratorio; manutenzione, sterilizzazione e smaltimento rifiuti.
iii) Propagazione delle colture cellulari e cinetiche di crescita cellulare. Conta cellulare. Adesione cellulare e tripsinizzazione. Congelamento e scongelamento. Metodi di valutazione della proliferazione cellulare, sopravvivenza e tossicità. Test di vitalità.
Prerequisiti
Conoscenza dei programmi di Biologia cellulare, Biochimica.
Conoscenza dei principali aspetti della Biologia Generale con particolare riguardo alla struttura della cellula e alle sue componenti.
Contenuti dell'insegnamento
Il corso si propone di fornire conoscenze e competenze nell’ambito delle più moderne tecniche di coltura cellulare bi- e tridimensionale e delle loro applicazioni in campo biomedico. Inoltre permetterà ai partecipanti di acquisire capacità pratiche di lavoro in sterilità e manipolazione delle cellule animali.
Programma esteso
L'insegnamento si propone di descrivere i principi di base delle colture cellulari e del loro utilizzo in molti campi della sperimentazione nel campo delle tecnologie biologiche e mediche e della diagnostica.
Il corso prevede una parte teorica che illustra
1. Vantaggi e svantaggi delle colture di cellule animali rispetto alla sperimentazione con animali
2. Ottenimento e propagazione di linee cellulari: colture cellulari primarie e stabilizzate; linee cellulari ingegnerizzate
3. Modelli di colture cellulari: mono e co-colture bi- e tridimensionali di cellule in sospensione ed in adesione;
4. Modelli di colture cellulari applicazioni e finalità
5. Laboratorio di colture cellulari:
a) il rischio biologico associato alla manipolazione di cellule umane e le fondamentali procedure biohazard da utilizzare nel laboratorio
b) utilizzo di reagenti e materiali per colture cellulari; composizione dei principali terreni di coltura cellulare e loro preparazione
c) utilizzo di cappe biologiche, incubatori, centrifughe, pipette e pipettatori
d) preparazione dei terreni di coltura
e) allestimento di una coltura, conta cellulare, subcoltivazione e stimolazione cellulare
f) analisi della vitalità cellulare mediante camera di conta Neubauer
g) congelamento e scongelamento delle cellule animali
h) La contaminazione delle colture cellulari.
Bibliografia
Metodi didattici
L’insegnamento si compone di lezioni frontali e di una parte di esercitazione di laboratorio.
Le esercitazioni di laboratorio sono mirate all’approfondimento e attuazione pratica delle corrette tecniche di base di manipolazione di colture cellulari,
In particolare saranno sviluppati esercizi a piccoli gruppi (4 studenti max) per la determinazione di:
• Semina cellule
• Tripsinizzazione
• Conta cellule con trypan blue
• Familiarizzazione con i cacoli per le diluizioni
• Vitalità cellulare in seguito a differenti trattamenti.
Modalità verifica apprendimento
Lo studente dovrà essere in grado di:
• Comprendere le finalità della pratica di colture cellulari
• Conoscere i principi che dettano la corretta pratica di colture cellulari
• Acquisire capacità pratiche di lavoro in sterilità, manipolazione delle cellule e misura di alcuni parametri.
• Acquisire la capacità di osservare correttamente un preparato al microscopio ottico invertito [capacità di mettere a fuoco a differenti ingrandimenti (10X, 20X e 40X) colture cellulari che crescono in monostrato o in sospensione].
La modalità di esame per la valutazione del raggiungimento da parte dello studente degli obiettivi prefissati dal corso avverrà con una verifica scritta.
La prova scritta consisterà in tre domande a risposta aperta inerenti agli argomenti affrontati a lezione + un problema che avrà 2 quesiti:
1) il calcolo per una corretta semina cellulare (argomento affrontato durante le esercitazioni pratiche di laboratorio)
2) il calcolo per una corretta diluizione di un farmaco (argomento affrontato a lezione e durante le esercitazioni pratiche di laboratorio).
E' attribuito un punteggio massimo pari a “8 punti” per ogni risposta aperta corretta e di un punteggio massimo pari a “8 punti” per il problema (4 punti per ciascun calcolo corretto).
Altre informazioni
Obiettivi agenda 2030 per lo sviluppo sostenibile
- - -
