Obiettivi formativi
L’obiettivo del corso è fornire agli studenti una conoscenza teorica e pratica delle metodologie alla base delle tecnologie ricombinanti e delle loro applicazioni in campo microbico, vegetale ed animale.
Il corso è diviso in tre parti:
1. Importanza e finalità del clonaggio genico. Applicazione delle tecnologie ricombinanti in cellule procariotiche
2. Applicazione delle tecnologie ricombinanti in campo vegetale
3. Applicazione delle biotecnologie in campo animale e in ambito medico
Prerequisiti
Sono necessarie conoscenze di biologia generale, botanica, microbiologia, biochimica, chimica ed una buona conoscenza della lingua inglese.
Contenuti dell'insegnamento
1. Parte generale
I principi fondamentali del clonaggio genico - Enzimi utilizzati in ingegneria genetica - Isolamento e purificazione di DNA genomico e plasmidico -
Elettroforesi di acidi nucleici - Vettori di clonaggio batterici - Vettori fagici: lambda e M13 - Sintesi in vitro di DNA (PCR) - Mutagenesi mediata da PCR - Vettori di clonaggio eucariotici - Costruzione ed analisi di librerie genomiche - Purificazione di RNA messaggero e conversione in cDNA - Costruzione ed analisi di librerie a cDNA - Sequenziamento del DNA.
2. Clonaggio in vegetali
Vettori di clonaggio per organismi vegetali - Metodi di trasformazione per organismi vegetali - Ottenimento di piante transgeniche.
3. Clonaggio in cellule animali ed applicazioni in campo biomedico
Crescita e proprietà delle cellule animali in coltura - Sistemi di selezione per cellule animali - Il trasferimento genico nelle cellule animali - Vettori plasmidici per cellule animali, ampliconi e vettori di espressione - Il destino del DNA trasferito – Vettori virali e retrovirali per cellule animali –Terapia genica -Principi e metodi - Modelli sperimentali – Alcuni risultati sperimentali - Potenziali modelli umani.
Programma esteso
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Bibliografia
- Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction, 8th Edition. Terry A. Brown. Zanichelli
- Dai geni ai genomi. Dale, von Schantz. EdiSES
- Analisi dei geni e genomi. Richard J. Reece. EdiSES
- Ingegneria genetica. Principi e tecniche. S. Primrose et al. Zanichelli
- DNA Ricombinante - J.D. Watson et al. Zanichelli
- Molecular biotechnology: principles and applications of recombinant DNA. Bernard R. Glick
- Molecular biology: principles of genome function. Nancy L. Craig. Oxford university press
- Ingegneria Genetica. S.M. Kingsman, AJ Kingsman. Piccin
- Genetica generale e umana. L. De Carli, E. Boncinelli, G.A. Danieli, L. Larizza. Piccin
Metodi didattici
Si attua attraverso:
1. lezioni frontali da parte del docente
2. seminari integrativi
3. esercitazioni pratiche in laboratorio
Modalità verifica apprendimento
Gli studenti possono scegliere tra diverse modalità di esame:
- una prova scritta sulla prima parte del corso (principi del clonaggio genico e applicazioni delle tecnologie ricombinanti in cellule procariotiche); una prova orale sulle altre parti del corso.
- un esame interamente orale (per gli studenti Erasmus).
In entrambi i casi, per poter sostenere l’esame lo studente deve preparare una relazione sulle esercitazioni di laboratorio che verrà valutata in sede d'esame dalla commissione.
La prova scritta e la relazione sulle esercitazioni di laboratorio verificano conoscenze e applicazione delle conoscenze. L'esame orale verifica le conoscenze acquisite dallo studente e le capacità comunicative. In tutti i casi, si verifica la capacità di apprendimento.
Altre informazioni
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Obiettivi agenda 2030 per lo sviluppo sostenibile
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