Obiettivi formativi
Nell’ambito del corso integrato, il modulo si propone di fornire agli studenti nozioni e strumenti culturali per l’allestimento di modelli ex vivo ed in vitro idonei allo studio dei meccanismi fisiopatologici.
Prerequisiti
Nessuno
Contenuti dell'insegnamento
-Colture d’organo e di tessuti
-La matrice extracellulare e la dissociazione dei tessuti
-Purificazione delle cellule
-Le linee cellulari
-La clonazione
-La coltivazione delle cellule animali
-Le contaminazioni delle colture
-Trasferimento di materiale genico
-La valutazione della vitalità e della proliferazione cellulare
-La valutazione della citotossicità
-Colture organotipiche
Programma esteso
Strategia delle colture cellulari
Biologia delle cellule coltivate. Vantaggi e svantaggi delle colture cellulari.
L’ambiente delle colture: substrati, media, temperatura, fattori di crescita, ecc. «Scaling-up» delle colture cellulari.
Cinetiche di crescita. Sopravvivenza e tossicità.
Disaggregazione dei tessuti e colture primarie
Separazione e caratterizzazione di specifici tipi cellulari.
Mantenimento delle colture.
Crioconservazione
Inquinamento della coltura cellulare.
La cellula neoplastica: caratteristiche morfologiche e metaboliche.
Linee cellulari stabilizzate.
Metodi per il trasferimento di geni terapeutici
• Trasfezione con metodi fisici: microiniezione, elettroporazione, bombardamento (gene gun)
• Lipofezione: liposomi, complessi DNA-lipidi cationici
• Vettori virali: retrovirus, adenovirus, virus adeno-associato, herpesvirus umani.
Bibliografia
R. Ian Freshney, Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique, 5th Edition, ISBN: 0-471-45329-3 Ed Wiley-
Jan-Thorsten Schantz & Kee Woei Ng: A MANUAL FOR PRIMARY HUMAN CELL CULTURE - ISBN 981-238-796-X(pbk) ed. World Scientific
Alan Doyle , J. Bryan Griffiths: Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures in Biotechnology ISBN: 0-471-98255-5- Ed Wiley
Metodi didattici
Lezione frontale con l'utilizzo di supporti audiovisivi, discussione in aula con gli
studenti, fornitura di supporti audiovisivi.
Modalità verifica apprendimento
Esame orale
Altre informazioni
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Obiettivi agenda 2030 per lo sviluppo sostenibile
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