Obiettivi formativi
Lo studente, sulla base della conoscenza della struttura e composizione del DNA, apprenderà le metodologie di biologia molecolare più avanzate utilizzate nella ricerca di base o a fini applicativi.
Prerequisiti
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Contenuti dell'insegnamento
La struttura del DNA, il codice genetico e la sintesi proteica.
Tecniche di analisi e manipolazione del DNA.
DNA ricombinante e strategie di clonaggio.
Tecniche di ibridazione.
Polymerase chain reaction.
Sequenziamento del DNA. Utilizzo di banche dati di sequenze nucleotidiche.
Programma esteso
La cellula batterica: approccio alla tecnologia del DNA ricombinante.
DNA: il materiale genetico primario
La struttura del DNA; codice genetico e sintesi proteica. Ruolo dei geni nelle cellule. Gli elementi regolatori dell’espressione genica (cenni).
Tecniche di analisi e manipolazione del DNA
Enzimi di restrizione, separazione elettroforetica. Enzimi di modificazione, reazioni in vitro.
DNA ricombinante e strategie di clonaggio
Vettori di clonaggio; competenza e trasformazione batterica
Tecniche di ibridazione
Genoteca, sonde ed ibridizzazione. Northern e Southern Blotting.
Polymerase chain reaction
Tecnologia PCR e sue applicazioni. Sequenziamento del DNA. La bioinformatica in funzione della analisi di sequenza: un approccio all’utilizzo delle banche dati di sequenze nucleotidiche.
Applicazioni della tecnologia del DNA ricombinante
Vettori di espressione procariotici: i plasmidi pUC e pET. Produzione di proteine ricombinanti ed ingegneria proteica (cenni).
Bibliografia
Allison L.A. Fondamenti di Biologia Molecolare, Zanichelli Ed.
Supporti informatici sono forniti dal docente.
Metodi didattici
Lezioni frontali con presentazioni e filmati.
Modalità verifica apprendimento
Esame orale
Altre informazioni
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