Obiettivi formativi
L’obiettivo del corso è quello di fornire agli studenti un'approfondita conoscenza teorico-pratica delle metodologie alla base della tecnologia del DNA ricombinante e delle sue principali applicazioni in ambito microbico, vegetale e animale.
Il corso è diviso in tre parti:
1. Le basi della tecnologia del DNA ricombinante e le sue principali applicazioni in ambito microbico
2. Applicazione della tecnologia del DNA ricombinante in campo vegetale
3. Applicazione della tecnologia del DNA ricombinante in campo animale
Prerequisiti
Sono necessarie conoscenze di biologia generale, botanica, microbiologia, biochimica, chimica ed una buona conoscenza della lingua inglese.
Contenuti dell'insegnamento
Il corso fornirà informazioni approfondite sulle metodologie e strategie alla base della tecnologia del DNA ricombinante.
Nello specifico verranno trattati i seguenti argomenti:
1. Le basi della tecnologia del DNA ricombinante:
- Il clonaggio genico
- Enzimi utilizzati in ingegneria genetica
- Isolamento e purificazione di DNA genomico e plasmidico
- Elettroforesi di acidi nucleici
- Vettori di clonaggio batterici
- Vettori fagici: lambda e M13
- Sintesi in vitro di DNA (PCR)
- Mutagenesi mediata da PCR
- Vettori di clonaggio eucariotici
- Costruzione ed analisi di librerie genomiche
- Purificazione di RNA messaggero e conversione in cDNA
- Costruzione ed analisi di librerie a cDNA
- Sequenziamento del DNA
2. Applicazioni della tecnologia del DNA ricombinante in ambito vegetale:
- Vettori di clonaggio per organismi vegetali
- Metodi di trasformazione di organismi vegetali
- Piante transgeniche
3. Applicazioni della tecnologia del DNA ricombinante in campo animale:
- Linee cellulari e sistemi di selezione per cellule animali
- Metodi di trasferimento genico in cellule animali
- Vettori plasmidici per cellule animali, ampliconi e vettori di espressione
- Vettori virali e retrovirali per cellule animali
- Terapia genica: principi e metodi, modelli sperimentali e principali risultati sperimentali
Programma esteso
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Bibliografia
- Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction, 8th Edition. Terry A. Brown. Zanichelli
- Dai geni ai genomi. Dale, von Schantz. EdiSES
- Analisi dei geni e genomi. Richard J. Reece. EdiSES
- Ingegneria genetica. Principi e tecniche. S. Primrose et al. Zanichelli
- DNA Ricombinante - J.D. Watson et al. Zanichelli
- Molecular biotechnology: principles and applications of recombinant DNA. Bernard R. Glick
- Molecular biology: principles of genome function. Nancy L. Craig. Oxford university press
- Ingegneria Genetica. S.M. Kingsman, AJ Kingsman. Piccin
- Genetica generale e umana (volume secondo). L. De Carli, E. Boncinelli, G.A. Danieli, L. Larizza. Piccin
Metodi didattici
Si attua attraverso:
1. lezioni frontali da parte del docente
2. seminari integrativi
3. esercitazioni pratiche in laboratorio
Modalità verifica apprendimento
La verifica dell'apprendimento si basa su:
- una prova scritta sugli aspetti fondamentali della tecnologia del DNA ricombinante e le sue applicazioni in ambito microbico;
- un esame orale sulle applicazioni della tecnologia del DNA ricombinante in ambito vegetale e animale.
Per poter sostenere l’esame lo studente deve aver partecipato alle esercitazioni organizzate in laboratorio e preparato una relazione che verrà valutata in sede d'esame dalla commissione.
La relazione sui laboratori, la prova scritta e l'esame orale permettono di verificare la capacità di apprendimento dello studente, la sua autonomia di giudizio, la sua capacità di applicare le conoscenze acquisite a problemi pratici di laboratorio e la sua capacità di comunicare quanto è stato appreso utilizzando una corretta terminologia. L'esame orale permette, inoltre, di verificare le capacità comunicative dello studente.
Altre informazioni
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