Obiettivi formativi
Il corso ha lo scopo di fornire allo studente le basi per comprendere le problematiche relative alla produzione di proteine ricombinanti. Attraverso esperienze pratiche lo studente acquisirà famigliarità con le principali tecniche che consentono, partendo da un gene, di ottenere la proteina purificata.
Prerequisiti
Lo studente deve avere conoscenze di base di biochimica e biologia.
Contenuti dell'insegnamento
La produzione di proteine ricombinanti per la ricerca di base e per applicazioni terapeutiche.
Panoramica dei sistemi di espressione.
Metodologie per la produzione di proteine ricombinanti.
Programma esteso
La produzione di proteine ricombinanti: scelta del sistema di espressione idoneo.
Rassegna delle applicazioni terapeutiche delle proteine ricombinanti.
Approfondimento di alcuni "case study".
Metodologie per la produzione di proteine ricombinanti in E. coli:
- identificazione del gene e ottimizzazione della sequenza
- PCR
- clonaggio ed analisi dei ricombinanti
- coltivazione di batteri
- espressione inducibile in batteri
- analisi e miglioramento dell'espressione
- estrazione e purificazione della proteina
Bibliografia
Materiale fornito dal docente scaricabile dal Portale Elly contenente copia delle diapositive e articoli scientifici selezionati.
Metodologie Biochimiche - Bonaccorsi di Patti, Contestabile e Di Salvo. Casa Editrice Ambrosiana, 1a edizione.
Biotecnologie Molecolari- Terry A. Brown. Zanichelli, 1a edizione.
Metodi didattici
Durante le lezioni frontali verranno spiegati i principi teorici della produzione di proteine ricombinanti e la loro applicazione ad ambiti diversi, specialmente quello farmaceutico. Attraverso esercitazioni le nozioni acquisite verrano messe in pratica al fine di stimolare l'acquisizione delle competenze di base riguardanti la produzione di proteine ricombinanti.
Modalità verifica apprendimento
Esame orale
Altre informazioni
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Obiettivi agenda 2030 per lo sviluppo sostenibile
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