Obiettivi formativi
In questo corso, lo studente riceverà una preparazione sistematica sulle principali tecniche impiegate nel laboratorio di biochimica per l’identificazione, l’isolamento, e lo studio strutturale e funzionale delle macromolecole biologiche.
Prerequisiti
Corsi di base in Fisica, Chimica, Microbiologia e Biochimica
Contenuti dell'insegnamento
Frazionamento subcellulare.
Tecniche centrifugative: centrifugazione differenziale e in gradiente.
Estrazione e purificazione di proteine.
Tecniche cromatografiche: cromatografia a scambio ionico; gel-filtrazione; cromatografia d’affinità. HPLC.
Tecniche elettroforetiche: princìpi ed applicazioni. SDS-PAGE, isoelectrofocusing, 2D-PAGE.
Tecniche immunochimiche: immunoprecipitazione, tecniche ELISA, Western blotting.
Tecniche spettrofotometriche (assorbimento e fluorescenza) e loro applicazioni.
I radioisotopi nell’analisi biochimica: rivelatori Geiger-Muller, la scintillazione liquida, autoradiografia, phosphorimaging.
Saggi enzimatici: continui, discontinui, reazioni accoppiate. Unità di attività.
Cenni sulla spettroscopia di massa: ionizzatori ad impatto elettronico, ESI, MALDI; rivelatori a deflessione magnetica, a quadrupolo e TOF.
Programma esteso
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Bibliografia
Ninfa & Ballou, Metodologie di base per la biochimica e la biotecnologia, Zanichelli ed.
Reed, Holmes, Weyers & Jones, Metodologie di base per le scienze biomolecolari, Zanichelli
Metodi didattici
Il corso si articola su lezioni frontali.
Modalità verifica apprendimento
Il corso preved un esame finale scritto.
Altre informazioni
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