Obiettivi formativi
In questo corso, lo studente riceverà una preparazione sistematica sulle principali tecniche impiegate nel laboratorio di biochimica per l’identificazione, l’isolamento, e lo studio strutturale e funzionale delle macromolecole biologiche.
Prerequisiti
Corsi di base in Fisica, Chimica, Microbiologia e Biochimica
Contenuti dell'insegnamento
Frazionamento subcellulare.
Tecniche centrifugative: centrifugazione differenziale e in gradiente.
Estrazione e purificazione di proteine.
Tecniche cromatografiche: cromatografia a scambio ionico; gel-filtrazione; cromatografia d’affinità. HPLC.
Tecniche elettroforetiche: princìpi ed applicazioni. SDS-PAGE, isoelectrofocusing, 2D-PAGE.
Tecniche immunochimiche: immunoprecipitazione, tecniche ELISA, Western blotting.
Tecniche spettrofotometriche (assorbimento e fluorescenza) e loro applicazioni.
I radioisotopi nell’analisi biochimica: rivelatori Geiger-Muller, la scintillazione liquida, autoradiografia, phosphorimaging.
Saggi enzimatici: continui, discontinui, reazioni accoppiate. Unità di attività.
Cenni sulla spettroscopia di massa: ionizzatori ad impatto elettronico, ESI, MALDI; rivelatori a deflessione magnetica, a quadrupolo e TOF.
Programma esteso
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Bibliografia
Ninfa & Ballou, Metodologie di base per la biochimica e la biotecnologia, Zanichelli ed.
Reed, Holmes, Weyers & Jones, Metodologie di base per le scienze biomolecolari, Zanichelli
Metodi didattici
Il corso si articola su lezioni frontali.
Modalità verifica apprendimento
L'apprendimento delle materie trattate verrà verificato mediante un esame finale scritto,
L'esame si articolerà in una sezione di quiz a risposta multipla ed in una sezione di domande a risposta aperta.
Altre informazioni
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