Obiettivi formativi
Introdurre lo studente all'apprendimento critico delle principali tecniche di genetica molecolare, partendo dall'estrazione, dalla quantificazione e dal controlo di qualità degli acidi nucleici per arrivare alla conoscenza e all'uso delle tecnologie più avanzate che avranno un ruolo fondamentale nela diagnostica genetica molecolare nell'immediato futuro.
Contenuti dell'insegnamento
Il paradosso C, stima del numero dei geni, DNA ripetuto, complessità del genoma.
Estrazione di DNA, RNA e proteina da sangue e tessuti.
PCR: ottimizzazione, RT_PCR
Elettroforesi degli acidi nucleici
Metodiche di screening per mutazioni o polimorfismi noti: SNP's, Enzimi di restrizione, Reverse Dot Blot, Sequenziamento diretto (secondo Sanger e con sequenziatori di nuova generazione.
Metodiche di screening per mutazioni o polimorfismi ignoti: SSCP, DGGE, DHOLC, HRM, sequenziamento diretto
Espressione genica: RT_PCR, Microarray
Analisi di CNV: Microarray, MLPA.
Un esempio: la Fibrosi Cistica: clinica, diagnostica e genetica; diagnosi molecolare
Bibliografia
Appunti dalle lezioni, protocolli scritti, articoli di riviste
Metodi didattici
Lezioni frontali, frequenza ed attività di laboratorio
