Obiettivi formativi
In questa sezione del corso, lo studente riceverà una preparazione sistematica sulle principali tecniche impiegate nel laboratorio di biochimica per l’identificazione, l’isolamento, e lo studio strutturale e funzionale delle macromolecole biologiche.
Prerequisiti
Prerequisiti fortemente consigliati: corsi di base in Fisica, Chimica, Microbiologia e Biochimica.
Contenuti dell'insegnamento
<br />Frazionamento subcellulare.<br />Tecniche centrifugative: centrifugazione differenziale e in gradiente.<br />Estrazione e purificazione di proteine.<br />Tecniche cromatografiche: cromatografia a scambio ionico; gel-filtrazione; cromatografia d’affinità. HPLC.<br />Tecniche elettroforetiche: princìpi ed applicazioni. SDS-PAGE, isoelectrofocusing, 2D-PAGE.<br />Tecniche immunochimiche: immunoprecipitazione, tecniche ELISA, Western blotting.<br />Tecniche spettrofotometriche (assorbimento e fluorescenza) e loro applicazioni.<br />I radioisotopi nell’analisi biochimica: rivelatori Geiger-Muller, la scintillazione liquida, autoradiografia, phosphorimaging.<br />Saggi enzimatici: continui, discontinui, reazioni accoppiate. Unità di attività.<br />Introduzione alla spettrometria di massa.<br />
Programma esteso
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Bibliografia
Rob Reed, David Holmes, Jonathan Weyers, Alla Jones<br />Metodologie di base per le scienze biomolecolari<br />Zanichelli, Bologna, 2002
Metodi didattici
Il corso prevede lezioni frontali.<br />La valutazione finale si baserà su una prova scritta.
Modalità verifica apprendimento
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Altre informazioni
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